Isolamento e identificação molecular dos enterovírus não pólio em casos de paralisia flácida aguda, ocorridos na Região Norte do Brasil, no período de 1996 a 2006
Revista Pan-Amazônica de Saúde (RPAS)
Isolamento e identificação molecular dos enterovírus não pólio em casos de paralisia flácida aguda, ocorridos na Região Norte do Brasil, no período de 1996 a 2006
Autor Correspondente: Jainara Cristina dos Santos Alves | [email protected]
Palavras-chave: Enterovírus Não-Pólio, Identificação Molecular, Infecções por Coxsackievirus, Echovirus, Amazônia
Resumos Cadastrados
Resumo Português:
Os enterovírus (EV) de origem humana pertencem à família Picornaviridae, possuem 30 nm de diâmetro, genoma de RNA de fita simples, sua transmissão é de via fecal-oral e têm sido relacionados a surtos de diversas doenças do sistema nervoso central. O estudo objetivou identificar a presença de enterovírus não pólio (EVNP) isolados de casos de paralisia flácida aguda (PFA). Linhagens celulares HEp-2C e RD que apresentaram efeito citopático foram selecionadas para testes moleculares posteriores. O RNA viral foi extraído utilizando-se o kit QIAamp Viral RNA. Os iniciadores 222 e 292, os quais amplificam parte da região VP1 do genoma dos EV, foram usados na técnica de reação em cadeia da polimerase precedida de transcrição reversa (RT-PCR) para a detecção molecular viral, produzindo um amplicon de 356 nucleotídeos. Entre os anos de 1996 a 2006, 538 amostras fecais de casos suspeitos de PFA, provenientes de toda a Região Norte do Brasil, foram encaminhadas ao Instituto Evandro Chagas. Deste total, 78 (14,5%; 78/538) apresentaram efeito citopático nas duas linhagens celulares. Posteriormente, 51 (65,4%; 51/78) foram positivas por RT-PCR. Os casos positivos de EV foram detectados nos Estados do Amazonas (14/51; 27,4%), Amapá (13/51; 25,5%), Pará (11/51; 21,6%), Rondônia (10/51; 19,6%) e Tocantins (3/51; 5,9%). A identificação por sequenciamento genômico foi possível em 40 amostras. Echovírus (20 casos, nove sorotipos) e coxsackievírus (dez casos, três sorotipos) foram as espécies predominantes encontradas. Os resultados deste estudo corroboram outros realizados no Brasil e no mundo, e servem de base para o melhor entendimento da epidemiologia molecular dos EV circulantes na Região Amazônica e a associação de seus diversos sorotipos com casos de doenças neurológicas.
Resumo Inglês:
Enteroviruses (EV) of human origin belong to the family Picornaviridae, they have 30 nm in diameter, genome of single-stranded RNA, with fecal-oral transmission and have been related to outbreaks of several diseases of the central nervous system. This study aimed to identify the presence of non-polio enteroviruses (NPEV) isolated from cases of acute flaccid paralysis (AFP). Cell lines Hep-2C and RD that presented cytopathic effect were selected for further molecular tests. The viral RNA was extracted using QIAamp Viral RNA mini kit. Primers 222 and 292, which increased part of the VP1 region of EV genome, were used in the reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) technique for molecular virus detection, producing an amplicon of 356 nucleotides. From 1996 to 2006, 538 fecal samples of AFP suspected cases from Northern Brazil were sent to the Instituto Evandro Chagas. Of this total, 78 (14.5%, 78/538) presented cytopathic effect in both cell lines. Thereafter, 51 (65.4%, 51/78) were positive by RT-PCR. EV positive cases were detected in the States of Amazonas (14/51, 27.4%), Amapá (13/51, 25.5%), Pará (11/51, 21.6%), Rondônia (10/51, 19.6%) and Tocantins (3/51, 5.9%). Genomic sequencing identification was performed in 40 samples. Echovirus (20 cases, nine serotypes) and coxsackievirus (ten cases, three serotypes) were the predominant species found. The results of this study corroborate others conducted in Brazil and in the world, and serve as basis for better understanding bout molecular epidemiology of EV circulating in the Amazon Region and its connection with several serotypes cases of neurologic diseases.
Resumo Espanhol:
Los enterovirus (EV) de origen humano pertenecen a la familia Picornaviridae, tienen 30 nm de diámetro, genoma de ARN de hebra simple, su transmisión es vía fecal-oral y han sido relacionados a brotes de diversas enfermedades del sistema nervioso central. El estudio tuvo como objetivo identificar la presencia de enterovirus no polio (EVNP) aislados de casos de parálisis fláccida aguda (PFA). Linajes celulares HEp-2C y RD que presentaron efecto citopático fueron seleccionadas para pruebas moleculares posteriores. El ARN viral se extrajo utilizando el kit QIAamp Viral ARN. Los iniciadores 222 y 292, que amplifican parte de la región VP1 del genoma de los EV, fueron usados en la técnica de reacción en cadena de la polimerasa precedida de transcriptasa reversa (RT-PCR) para la detección molecular viral, produciendo un amplicón de 356 nucleótidos. Entre los años de 1996 a 2006, 538 muestras fecales de casos sospechosos de PFA, provenientes de toda la Región Norte de Brasil, fueron enviadas al Instituto Evandro Chagas. De este total, 78 (14,5%; 78/538) presentaron efecto citopático en los dos linajes celulares. Posteriormente, 51 (65,4%; 51/78) fueron positivas por RT-PCR. Los casos positivos de EV se detectaron en los Estados de Amazonas (14/51; 27,4%), Amapá (13/51; 25,5%), Pará (11/51; 21,6%), Rondônia (10/51; 19,6%) y Tocantins (3/51; 5,9%). La identificación por secuenciación genómica fue posible en 40 muestras. Echovirus (20 casos, nueve serotipos) y coxsackievirus (diez asos, tres serotipos) fueron las especies predominantes halladas. Los resultados de este estudio corroboran otros realizados en Brasil y en el mundo, y sirven de base para la mejor comprensión de la epidemiología molecular de los EV circulantes en la Región Amazónica y la asociación de sus diversos serotipos con casos de enfermedades neurológicas.
