O objetivo deste estudo foi identificar Staphylococcus spp. Resistente à Meticilina (MRS) em um Centro Cirúrgico de Grandes Animais. Foram coletadas 24 amostras deste local, em pontos estratégicos, antes e após limpeza e desinfecção. A detecção de MRS foi realizada pela técnica de disco-difusão com discos de penicilina, oxacilina e cefoxitina. Os resultados das coletas feitas no ambiente sem desinfecção mostram a presença de Staphylococcus spp. em 58,3% das amostras, sendo 85,7% destas MRS. Dentre as seis amostras oxacilina-resistentes, todas foram resistentes a penicilina e duas foram resistentes a cefoxitina. Na coleta após a desinfecção foram identificados estafilococos em 33,33% das amostras, sendo dois MRS. Com este estudo pode-se concluir que a presença de MRS é uma realidade na Medicina Veterinária Hospitalar, semelhante ao ocorrido em Hospitais Humanos. Trata-se de um patógeno de fácil transmissão, devendo-se tomar medidas profiláticas, como limpeza de mãos e utensÃlios médicos para evitar sua disseminação, além do uso correto da antibioticoterapia.