Aumento na sobrevivência após vitrificação de oócitos bovinos imaturos em recipientes com maior condutividade térmica e nitrogênio super-resfriado

Ano: 2008 | Volume: 36 | Número: 3

Autores: Silvério Bunn, Fabiano Buss Cruz, Cesar Augusto Ferraz Pedrazzi, Marcelo Bertolini, Arnaldo Diniz Vieira, Alceu Mezzalira

Palavras-chave: vácuo, micropipeta de vidro, palheta de metal, ops, oócitos, bovinos

Resumo Português:

A condutividade térmica do recipiente pode alterar a velocidade de resfriamento e reaquecimento, durante a
criopreservação de oócitos, influenciando sua viabilidade. Recipientes de diferentes condutividades térmicas foram comparados
na vitrificação de oócitos bovinos. Oócitos imaturos (n=1454) foram expostos a uma solução de 20% EG + 20% DMSO e 0,5 M
Sacarose, envasados em PM (palheta metálica inoxidável, n=265), MV (micropipeta de vidro, n=279), PB (palheta cortada em
bisel, n=280), OPS (open pulled straw, n=272) e vitrificados em nitrogênio submetido ao vácuo. O reaquecimento foi realizado
por 5 minutos de exposição a cada solução de sacarose (0,30 e 0,15 M), aquecidas a 35ºC. Como controle, 358 oócitos foram
mantidos frescos, sem vitrificar. Os oócitos foram maturados e fecundados, sendo os prováveis zigotos cultivados em meio
SOFaaci, a 39ºC, com 5% CO2, 5% O2 e 90% N2, em umidade saturada. Não foram verificadas diferenças nas taxas de clivagem
entre os tratamentos, que foram inferiores (p < 0,05) ao grupo controle. Nos grupos vitrificados, maior taxa de blastocisto foi
obtida com o tratamento PM (10,2%), que foi superior (p < 0,05) aos tratamentos OPS (6,1%) e PB (6,1%), não diferindo do
grupo MV (8%), embora com tendência de ser superior (p < 0,1). Os grupos tratados tiveram semelhantes taxas de eclosão que,
todavia, foram inferiores ao controle. Conclui-se que o aumento da velocidade de resfriamento melhora a viabilidade após a
vitrificação de oócitos bovinos imaturos, sendo que as palhetas metálicas, de maior condutividade, são mais efetivas do que
as palhetas plásticas (OPS e PB), embora sem diferir da micropipeta de vidro (MV).

Resumo Inglês:

The thermal conductivity of the container can affect the cooling and warming rate during the oocyte cryopreservation,
influencing its viability. Containers of different thermal conductivities were compared for the vitrification of bovine oocytes.
Immature oocytes (n=1454) were exposed to a 20% EG + 20% DMSO and 0.5 M Sucrose solution, loaded into PM (stainless
straws, n=265), MV (glass micropipettes, n=279), PB (beveled-cut straws, n=280), OPS (open pulled straws, n=272) and
vitrified in nitrogen submitted to vacuum. Rewarming was performed by 5 min exposure to each sucrose solution (0.30 and
0.15 M), at 35ºC. As control, 358 oocytes were used fresh (non-vitrification). Oocytes were in vitro-matured and fertilized, with
the presumptive zygotes being cultured in SOFaaci medium at 39ºC, with 5% CO2, 5% O2 and 90% N2, in saturated humidity.
No differences in cleavage rates were detected between treatments, being all lower than the control group (p < 0.05). In the
vitrified groups, the highest blastocyst rate was observed in the PM treatment (10.2%), which in turn was higher (p < 0.05) than
both the OPS (6.1%) and PB treatments (6.1%). However, although a trend existed (p < 0.1), no difference was observed
between the PB and the MV treatments (8%). All treatment groups had identical hatching rates, which were lower than the
control group. We concluded that the increase in cooling rates improved the viability of immature bovine oocytes after the
vitrification, and that higher conductivity stainless straws were more effective for oocyte vitrification than plastic straws (OPS
and PB), albeit not different from the glass micropipette (MV).