A transmissão intra-hospitalar da tuberculose consiste em um problema de saúde ocupacional, e as medidas de controle efetivas incluem os controles ambientais que visam prevenir a disseminação dessa doença e reduzir as partÃculas infecciosas aéreas. Trata-se de um estudo descritivo, realizado com o objetivo de descrever a estrutura necessária para implantar e operacionalizar uma unidade de isolamento para tuberculose com pressão negativa do ar. A unidade foi projetada com um sistema de climatização com controle de temperatura de 22±2 oC, recirculação do ar, filtragem HEPA, 20 trocas de ar por hora e pressão negativa. Após a reforma da unidade e a implantação dos controles ambientais, o funcionamento do isolamento respiratório foi monitorizado por 12 meses. As ocasiões em que a pressão negativa tornou-se neutra foram identificadas pelos manômetros nos quartos e nos filtros, indicando a saturação deles e sua substituição. Em seguida, a pressão negativa foi restabelecida. O investimento para a implantação do isolamento foi de 75 mil dólares e o custo mensal de manutenção 550 dólares. A unidade requer um gerenciamento apropriado para assegurar a proteção dos profissionais da saúde e demais pacientes.