Identificação de Campylobacter jejuni e Campylobacter coli isoladas de carcaças resfriadas de Frango pela Multiplex PCR | Identification of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from refrigerated c

Ano: 2015 | Volume: 3 | Número: 3

Autores: Valeria de Mello Medeiros; Silvia Maria Lopes Bricio; Maysa Mandetta Clementino

Palavras-chave: Campylobacter jejuni; Campylobacter coli; Multiplex PCR; Campylobacter jejuni; Campylobacter coli; Multiplex PCR

Resumo Português:

Campylobacter jejuni e C. coli constituem as espécies termofílicas mais frequentemente isoladas em casos de enterites humanas, devido à ingestão de alimentos à base de frango mal cozido ou através da contaminação cruzada durante a manipulação de alimentos crus. A diferenciação bioquímica de C. jejuni e C. coli apresenta inconsistências, como a hidrólise do hipurato e a sensibilidade ao ácido nalidíxico e à cefalotina. Desta forma, a aplicação de métodos moleculares se faz necessário na identificação dessas espécies. O objetivo deste trabalho foi realizar a identificação de C. jejuni e C. coli isolados de carcaças resfriadas de frango pela Multiplex PCR. Para isso, o gene que codifica uma subunidade de oxirredutase (160 pb) e o gene de virulência ceuE (894 pb) específicos para C. jejuni e C. coli, respectivamente, foram submetidos a PCR, simultaneamente. Dos 21 isolados analisados pela bioquímica, 19 (90,48%) foram identificados como C. jejuni um (4,76%) como C. coli e um (4,76%) não identificado. A Multiplex PCR confirmou a presença de 90,48% de C. jejuni e 9,52% de C. coli. A abordagem proposta apresentou rapidez, sensibilidade e especificidade e, assim, poderia ser considerada uma boa alternativa para ensaios clínicos de rotina e estudos epidemiológicos.

Resumo Inglês:

Campylobacter jejuni and C. coli are the most frequently identified thermophilic species in cases of human enteritis caused by the consumption of food products made with undercooked chicken or cross-contamination during handling of raw food products. The biochemical differentiation of C. jejuni and C. coli shows inconsistencies, such as hippurate hydrolysis and sensitivity to nalidixic acid and cephalothin. Consequently, the use of molecular methods is necessary to identify these species. The objective of this study was to identify C. jejuni and C. coli isolates from refrigerated chicken carcasses using multiplex PCR. For this purpose, the genes encoding a 160-bp subunit of oxidoreductase and the 894-bp ceuE virulence gene specific for C. jejuni and C. coli, respectively, were concurrently subjected to PCR. Of the 21 isolates assessed biochemically, 19 (90.48%) were identified as C. jejuni, one (4.76%) as C. coli, and one (4.76%) was not identified. Multiplex PCR confirmed the presence of 90.48% C. jejuni and 9.52% C. coli. The proposed approach was rapid, sensitive, and specific and is a good alternative for routine clinical testing and epidemiological studies.