Isolamento e avaliação do comportamento do vírus ORF em células de córnea fetal caprina e identificação pela Reação em Cadeia da Polimerase
Revista Agrária Acadêmica
Isolamento e avaliação do comportamento do vírus ORF em células de córnea fetal caprina e identificação pela Reação em Cadeia da Polimerase
Autor Correspondente: Rosana Léo de Santana | [email protected]
Palavras-chave: Parapoxvírus, efeito citopático, PCR, ectima contagioso
Resumos Cadastrados
Resumo Português:
O controle da infecção em regiões endêmicas é realizado através de vacinação, no entanto ocorrem limitações na produção de vacinas devido à dificuldade de replicação do vírus em cultura celular. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de isolar e avaliar o comportamento de amostras de ECV em uma linhagem de células de córnea fetal caprina (CorFC) naturalmente imortalizada. Amostras de crostas de vinte e dois ovinos e de sete caprinos que apresentavam sinais clínicos de EC, originários dos Estados de Pernambuco, Bahia, Sergipe e Paraíba, foram isoladas em monocamadas de células CorFC e identificadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando primers para amplificação de um fragmento de 235 pb do gene B2L do envelope do ECV. Onze amostras foram submetidas a sete passagens consecutivas, a intervalos semanais. Observou-se em todas as passagens, a partir de 24 horas pós-infecção, efeito citopático (ECP) caracterizado por arredondamento celular, fusão com formação sincicial, inclusão citoplasmática e vacuolização. Deste modo, concluiu-se que as culturas de células CorFC mostraram-se altamente permissíveis à replicação do ECV, com pequena variação entre as amostras virais. A PCR indicou ser um método eficiente para confirmação da infecção por ECV em amostras clínicas.
Resumo Inglês:
The control of the infection in endemic regions is performed with vaccines, however there are limitations in the vaccine production due to the difficulties in replicating the virus in cell cultures. This work was conducted so as to isolate and evaluate the behavior of ECV samples in fetal goat cell line cornea (CorFC) naturally immortalized. Crust samples from 22 sheep and seven goats presenting the clinical symptoms of EC from the states of Pernambuco, Bahia, Sergipe and Paraíba, were inoculated in CorFC monolayers and identified by polymerase chain reaction (PCR) using primers for amplification of a fragment of235 bp of gene B2L envelope ECV. Eleven samples were submitted to seven consecutive passes, at weekly intervals. Cytopathic effect (CPE) was observed in all passages, after24 hours post-infection, characterized by cell rounding, syncytial fusion with training, inclusion and cytoplasmic vacuolization. Thus, CorFC cell cultures proved highly permissible to ECV replication with small variation among viral samples. The PCR technique can be an efficient method used for confirmation of ECV infection in clinical samples.
