Light Microscope Observation of Circulating Human Lymphocytes Cultured in Vitro

Ano: 2010 | Volume: 53 | Número: 5

Autores: Naila Francis Paulo de Oliveira, Mary Anne Heidi Dolder, Selma Candelária Genari

Palavras-chave: blood, in vitro, lymphocytes, microscopy, morphology, percoll

Resumo Português:

Os linfócitos são células importantes do sistema
imune e têm sido largamente utilizados em estudos
morfológicos. Entretanto, a literatura sobre
técnicas de preparação dessas células é escassa e
antiga, especialmente para linfócitos cultivados in
vitro. Portanto, o objetivo desse estudo foi relatar
com detalhes as técnicas de isolamento e
microscopia de luz de linfócitos mantidos em
cultura. Amostras de sangue foram obtidas por
punção venosa e centrifugadas em gradiente de
densidade de Percoll, para separar os leucócitos.
Os linfócitos foram mantidos em frascos de cultura
de 25 cm3 a 37°C. Após a cultura, as células foram
fixadas e coradas de acordo com a metodologia
utilizada para esfregaços sanguíneos. Nossos
resultados mostraram que nem todos os fixadores e
corantes utilizados para esfregaços sanguíneos são
uma boa escolha para linfócitos cultivados in vitro.

Resumo Inglês:

The purpose of this work was to study the isolation and a light microscopy technique for cultured lymphocytes.
Blood samples were obtained by venipuncture with an anticoagulant added and centrifuged in a Percoll density
gradient to separate the leukocytes. Lymphocytes were placed in 25 cm3 tissue culture flasks at 37°C. After
culturing, they were fixed and stained with the methods used for blood smears. Results showed that not all fixing
solutions and stains were an equally good choice for cultured lymphocytes.