Methodological Variations in the Isolation of Genomic DNA from Streptococcus Bacteria

Ano: 2010 | Volume: 53 | Número: 4

Autores: Mônica Moreira, Juliana Noschang, Ivana Froede Neiva, Yanê Carvalho, llma Hiroko Higuti, Vânia Aparecida Vicente

Palavras-chave: streptococcus, dna isolation, ctab, ultrasound

Resumo Português:

O gênero Streptococcus encontra-se amplamente
distribuído na natureza e algumas espécies
constituem a microbiota humana da cavidade
bucal, como Streptococcus pyogenes, que pode
estar associado a importantes doenças humanas,
Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus,
relacionados à cárie dental. O DNA genômico
destas três espécies foi isolado utilizando-se dois métodos, o primeiro utilizando o detergente
brometo de cetiltrimetilamônio (CTAB) à 65ºC e
outro associando ultra-som a uma mistura de sílica
e celite em CTAB. O método que possibilitou a
extração do DNA genômico das bactérias Gram
positivas, com qualidade, boa reprodutibilidade
fácil execução foi aquele que utilizou ultra-som
associado à sílica e celite em CTAB.

Resumo Inglês:

In this work, genomic DNA of Streptococcus pyogenes, S. mutans and S. sobrinus was isolated using two methods:
either using the detergent cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) at 65ºC; or by applying ultrasound to a mixture
of silica and celite in CTAB. The composite method that used ultrasound was the more efficient, allowing the
straightforward extraction of genomic DNA from Gram-positive bacteria with good quality and reproducibility.