Os espaçadores internos transcritos do DNA
nuclear ribossomal (ITS1 e ITS2) de folhas de
Drosera (Droseraceae) foram amplificados com o
emprego de iniciadores “universaisâ€. A análise
demonstrou que a maior parte das amostras
continha uma mistura resultante de amplificações
não-especÃficas. Dentre as sequências de DNA
obtidas, duas delas foram de fungos
basidiomicetos. Sequências homólogas foram
obtidas do GenBank e analisadas junto à s
sequências obtidas de folhas de Drosera. Através
das análises filogenéticas de máxima parcimônia
foi possÃvel identificar uma seqüência como sendo
de um Ustilaginomycetes e outra de
Heterobasidiomycetes (Basidiomycota).
Possivelmente esses organismos estavam
associados às folhas de Drosera e assim não sejam
resultantes de contaminação. Com o objetivo de
otimizar e buscar uma melhor especificidade das
reações de PCR, um protocolo bem sucedido foi
demonstrado com o uso de dimetilsulfóxido
(DMSO) e soroalbumina bovina (BSA).
The nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2) from leaves of Drosera (Droseraceae)
were amplified using “universal†primers. The analysis of the products demonstrated most samples were a
molecular mixture as a result of unsuccessful and non-specific amplifications. Among the obtained sequences, two
were from Basidiomycota fungi. Homologous sequences of Basidiomycota were obtained from GenBank database
and added to a data set with sequences from Drosera leaves. Parsimony analysis demonstrated that one sequence
was amplified from an Ustilaginomycetes fungus, and another from a Heterobasidiomycetes. Possibly these fungi
were associated to leaves of Drosera, and not because of samples contamination. In order to provide optimization
and a better specificity of PCR (polymerase chain reaction), a very successful method was demonstrated using
dimethyl sulfoxide (DMSO) and bovine serum albumin (BSA) in reactions.
