POLISSACARÍDEOS SULFATADOS DA RODOFÍCEA Halymenia pseudofloresia (COLLINS & M. HOWE): ANÁLISE DE METODOLOGIAS DE PRECIPITAÇÃO

Ano: 2010 | Volume: 5 | Número: 2

Autores: José Ariévilo Gurgel RODRIGUES, Wladimir Ronald Lobo FARIAS

Palavras-chave: halymeniaceae, halymeniales, polímeros de carboidratos, métodos de obtenção

Resumo Português:

Os polissacarídeos sulfatados (PS) são macromoléculas complexas e heterogêneas de grande
interesse em Biotecnologia. A rodofícea Halymenia pseudofloresia tem sido relatada como
possuidora de PS com atividades biológicas. Porém, o emprego de diferentes técnicas pode
influenciar o rendimento e/ou as propriedades químicas desses compostos. Desta forma a busca
por novas estratégias de obtenção desses polímeros sugerem estudos. Avaliou-se a eficiência de
duas metodologias de precipitação (M I e M II) dos PS isolados da alga marinha vermelha H.
pseudofloresia, comparando o rendimento, o fracionamento e o grau de purificação. O PS total
(PST) foi obtido com papaína bruta em tampão acetato de sódio 0,1 M (pH 5,0) contendo
cisteína 5 mM e EDTA 5 mM. O PST assim obtido foi precipitado com uma solução de cloreto
cetilpiridínio (CCP) a 10% (M I) ou, alternativamente, com etanol absoluto (M II). O PST foi
analisado por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose utilizando um
gradiente de NaCl, sendo as frações de PS obtidas submetidas a procedimento de eletroforese em
gel de agarose a 0,5%. Verificou-se que tanto os rendimentos como os perfis cromatográficos de
PST foram diferentes entre os métodos. O M II foi mais eficiente na obtenção de PST (46,08%)
quando comparado ao M I (41,16%). A separação de seis diferentes frações de PS (F I; F II; F
III; F IV; F V e F VI), eluídas com 0,50; 0,75; 1,00; 1,25; 1,50 e 1,75 M de sal, respectivamente,
também foram obtidas com o emprego do M II quando comparadas ao M I, porém revelando,
por eletroforese, moléculas com baixo grau de purificação em ambos os métodos. Por outro lado,
os resultados sugerem que a utilização de apenas etanol seria uma forma mais econômica para a
obtenção de PS da rodofícea H. pseudofloresia.

Resumo Inglês:

Sulfated polysaccharides (SP) are complex and heterogeneous macromolecules of a great interest
in Biotechnology. The Halymenia pseudofloresia rhodophyceae has been reported to have SP
possessing biological activities. However, the employment of different techniques can influence
the yield and/or chemical properties of these compounds. The search of new strategies of
obtaining these polymers suggests studies. It was aimed to evaluate the efficiency of two
precipitation methods (M I and M II) of SP isolated from the red marine alga H. pseudofloresia
comparing the yield, fractionation and purification degree. Total SP (TSP) was obtained with
crude papain in 0.1 M sodium acetate buffer (pH 5.0) containing 5 mM cysteine and 5 mM
EDTA, and then precipitated with a 10% cetylpiridinium chloride (CPC) solution (M I) or,
alternatively, by absolute ethanol (M II). The TSP was analyzed by ion-exchange
chromatography on DEAE-cellulose column using a NaCl gradient. The obtained SP fractions
were submitted to 0.5% agarose gel electrophoresis procedure. The yields and the
chromatographic profiles were different between the methods. TSP was more efficient obtained
in M II (46.08%) when compared to M II (41.16%), and six different fractions of SP (F I, F II, F
III, F IV, F V and F VI), eluted at 0.50, 0.75, 1.00, 1.25, 1.50 and 1.75 M of salt, respectively,
were also obtained using the M II when compared to M I, but on both methods the
electrophoresis procedure revealed molecules with low degree of purification. On the other hand,
the results suggest that the only use of ethanol would be a more economical procedure for
obtaining SP from H. pseudofloresia rhodophyceae.