Purificação e caracterização parcial de uma enzima lacase (ec 1.10.3.2) extracelular obtida através de fermentação em fase sólida

Ano: 2010 | Volume: 11 | Número: 1

Autores: Márcio Vinicius de Carvalho Barros Côrtes, Reginaldo Ramos de Menezes, Lúcia Moreira Campos Paiva, Octávio Augusto Ceva Antunes

Palavras-chave: lentinus edodes, corantes, tratamento de efluentes

Resumo Português:

Efluentes contendo corantes, oriundos de processos industriais, consistem em
grave problema ambiental. As tecnologias disponíveis para tratamento desses
rejeitos são pouco efetivas, além de possuírem alto custo. Devido à capacidade
de catalisar a oxidação de diversos compostos fenólicos, a enzima lacase consiste
em uma alternativa plausível como agente para o tratamento de efl uentes
contendo corantes. O objetivo desse trabalho consistiu na obtenção, purifi cação
e caracterização parcial do extrato de uma enzima lacase extracelular, secretada
pelo fungo Lentinus edodes durante o processo de produção industrial do
cogumelo comestível Shiitake, visando sua utilização futura em processos de
remediação de ambientes e síntese orgânica. O extrato bruto foi obtido pela
aplicação de solução tampão acetato 0,05 M ao substrato previamente cultivado.
Foram empregadas metodologias clássicas de purifi cação e concentração de
proteínas. Também foram aplicados métodos moleculares para caracterização
do extrato protéico purifi cado. O material foi obtido com 14,8% de rendimento
total. A massa molecular da proteína foi estimada em 84 KDa, com características
monoméricas, além de não apresentar isoformas.

Resumo Inglês:

Wastewater containing dyes from industrial processes consists of major
environmental problem. Besides being expensive, the available technologies
for treating these wastes are not very effective. Due to the ability to catalyze
the oxidation of various phenolic compounds, laccase enzyme is a plausible
alternative as an agent for treatment of dye wastewater. The aim of the present
study was the production, purifi cation and partial characterization of an enzyme
extract of extracellular laccase, secreted by the fungus Lentinus edodes during
industrial production of edible Shiitake mushroom, for their future use in
environment remediation processes and organic synthesis. The crude extract
was obtained by applying 0.05 M acetate buffer solution to the used substrate.
Classic methodologies were applied for purifi cation and concentration of
proteins. Molecular methods were also applied to characterize the purifi ed
protein extract. The material was obtained with 14.8% overall yield. Protein
molecular weight was estimated 84 kDa, with monomeric characteristics, and
no reported isoforms.