Escherichia coli faz parte da nossa microbiota podendo ser encontrada no intestino dos mamíferos em geral, colonizando a mucosa do cólon, principalmente de recém nascidos, convivendo de maneira saudável durante muitos anos, porém, essas estirpes comensais podem causar doenças em hospedeiros imunodeprimidos ou com barreira gastrointestinal rompida. As cepas patogênicas de Escherichia coli podem utilizar de vários mecanismos de invasão e escape da resposta imunológica natural. Esses mecanismos de virulência permitem a classificação em diferentes patotipos, onde neste trabalho iremos abordar a resposta imune inata contra Escherichia coli Enterohemorrágica (EHEC). Portanto, nesse trabalho objetivou-se estabelecer a relação entre a resposta celular na fase inicial da infecção por Escherichia coli através do perfil das citocinas Interleucina 1 beta (IL-1β) e Fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) no início da infecção experimental em camundongos infectados com cepas diarreiogênicas e não diarreiogênicas. Para isso, foram utilizados 60 camundongos Swiss, divididos em 3 grupos (Controle, ATCC e EHEC) nos tempos 30 minutos, 3, 6, 12, 24 e 48 horas. Os animais foram eutanasiados, inoculados 4 ml de soro fisiológico intraperitoneal para obtenção de exsudato peritoneal e realizado a dosagem de citocinas pró-infamatórias por meio de Ensaio Imunoenzimático de captura. Avaliando o perfil de IL-1 das cepas ATCC e EHEC verificou-se uma diferença significativa entre os grupos nos tempos estudados, onde a cepa ATCC apresentou dosagens superiores, alterando seu perfil em 24 horas e 48 horas de infecção. O pico de IL-1 da cepa EHEC ocorreu em 12 horas, decaindo posteriormente, porém, sem retornar no nível do controle. Em relação a dosagem de TNF, as cepas de EHEC apresentaram grande variação em 6 horas e 24 horas. Nos primeiros trabalhos de perfil imunológico foi relacionada a indução da expressão de citocinas pró-inflamatórias como IL-1β e TNF-α com a presença de Stx, assim como a síntese específica de TNF-α no rim. O padrão de citocina IL-1β observado nos animais infectados por EHEC, em relação aos infectados por ATCC revela uma característica altamente patogênica desta cepa e a importância do entendimento do processo infeccioso e inflamatório gerado por EHEC, bem como o perfil de citocinas para diminuir a ocorrência de SHU e mortalidade.
Escherichia coli is part of our microbiota and can be found in the intestine of mammals in general, colonizing the colon mucosa, especially in newborns, coexisting healthily for many years. However, these commensal strains can cause diseases in immunocompromised hosts or in those with a broken gastrointestinal barrier. Pathogenic strains of Escherichia coli can use several mechanisms of invasion and escape from the natural immune response. These virulence mechanisms allow classification into different pathotypes, where in this work we will address the innate immune response against Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC). Therefore, this work aimed to establish the relationship between the cellular response in the initial phase of Escherichia coli infection through the profile of the cytokines Interleukin 1 beta (IL-1β) and Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α) at the beginning of the experimental infection in mice infected with diarrheagenic and non-diarrheogenic strains. For this purpose, 60 Swiss mice were divided into 3 groups (Control, ATCC and EHEC) at 30 minutes, 3, 6, 12, 24 and 48 hours. The animals were euthanized, 4 ml of saline solution was inoculated intraperitoneally to obtain peritoneal exudate and pro-inflammatory cytokine levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Evaluating the IL-1 profile of the ATCC and EHEC strains, a significant difference was observed between the groups at the studied times, where the ATCC strain presented higher levels, changing its profile at 24 hours and 48 hours of infection. The peak of IL-1 of the EHEC strain occurred at 12 hours, decreasing subsequently, however, without returning to the control level. Regarding the TNF level, the EHEC strains showed great variation at 6 hours and 24 hours. In the first studies of immunological profiling, the induction of the expression of pro-inflammatory cytokines such as IL-1β and TNF-α was related to the presence of Stx, as well as the specific synthesis of TNF-α in the kidney. The pattern of IL-1β cytokine observed in animals infected by EHEC, in relation to those infected by ATCC, reveals a highly pathogenic characteristic of this strain and the importance of understanding the infectious and inflammatory process generated by EHEC, as well as the cytokine profile to reduce the occurrence of HUS and mortality.
