Uma alternativa para diminuir o custo de produção do tomateiro é o uso de propagação assexuada para a obtenção de mudas, além disso, a utilização de um substrato adequado pode promover um melhor enraizamento e desenvolvimento das estacas. Assim, objetivou-se com este trabalho avaliar o efeito de diferentes formas de propagação e substratos na produção de mudas de tomateiro. Realizou-se o experimento em casa de vegetação com estacas coletadas a partir de brotos laterais de plantas matrizes sadias, padronizadas em dois tamanhos e sementes hÃbridas de tomateiro. As estacas e sementes foram cultivadas em dois substratos comerciais, em delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3x2 (propagação x substratos), quatro repetições, totalizando 24 parcelas. Houve interação entre as formas de propagação e os tipos de substratos para as seguintes caracterÃsticas: massa fresca das raÃzes, massa fresca da parte aérea, comprimento da raiz principal, comprimento final da parte aérea, massa seca da raiz, massa seca da parte aérea, massa fresca total e massa seca total. O enraizamento foi afetado pelo substrato, enquanto o comprimento da raiz principal pelas formas de propagação. As estacas de 11 cm de comprimento se destacaram, tornando a propagação vegetativa do tomateiro viável. A utilização do substrato de fibra de coco promoveu melhor desenvolvimento radicular.