IMUNOGENICIDADE DE PROTEÍNAS DO CAPSÍDEO DO Cowpea severe mosaic virus (CPSMV)

Ano: 2009 | Volume: 33 | Número: 1

Autores: José Evando Aguiar Beserra Júnior, Márcia Maria Mendes Marques, Beatriz Meireles Barguil, Carlos Alberto Furtado Lopes Junior e Maria Izabel Florindo Guedes

Palavras-chave: comovirus, imunização nasal, imunização oral, vacina, vetor viral

Resumo Português:

A análise SDS-PAGE do Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) purificado revelou a migração de três frações protéicas
estimadas em 43, 23 e 21 kDa, correspondentes às proteínas do capsídeo: denominadas proteína maior (43 kDa) e menor (23 kDa;
intacta e 21 kDa; clivada). As proteínas do capsídeo, na sua forma nativa, foram utilizadas na imunização de camundongos pelas vias
oral e nasal, durante 10 dias consecutivos. As frações protéicas de 43 e 23 kDa, em sua forma desnaturada, foram utilizadas para
imunização subcutânea. A resposta imunológica da mucosa foi avaliada pela proliferação celular das placas de Peyer de camundongos
imunizados pela via oral com o CPSMV purificado. Ficou demonstrado que o CPSMV induz resposta imunológica, evidenciada pela
síntese de anticorpos séricos, quando administrado na sua forma nativa pelas vias oral e nasal ou através de suas proteínas do capsídeo
desnaturadas, pela via subcutânea. Não foi necessário o uso de adjuvantes, quer por via oral quer por via nasal. As frações protéicas
de 43 e 23 kDa mostraram-se responsáveis pela imunogenicidade do vírus, como foi evidenciado pela síntese de anticorpos específicos
detectados por ELISA. A análise da proliferação celular da placas de Peyer revelou um aumento (r=0,88) do número de leucócitos ao
longo de 42 dias após a imunização. Esses resultados reforçam a possibilidade do uso do CPSMV como vetor seguro de antígenos de
doenças humanas/animais pouco imunogênicos para produção de vacinas.

Resumo Inglês:

SDS-PAGE analysis of purified Cowpea severe mosaic virus (CPSMV) revealed the migration of three protein fractions of
43, 23 and 21 kDa, corresponding to the capsid protein called large protein (43 kDa) and small protein (23 kDa; intact and 21 kDa;
cleaved). The capsid proteins, in their native form, were used to immunize mice through oral and nasal routes for ten consecutive
days. The denatured form of the 43 and 23 kDa protein fractions were used for subcutaneous immunization. The mucosal immune
response was detected by the cellular proliferation of the Peyer‘s patches of mice immunized by oral route with CPSMV. It was
demonstrated that CPSMV induces immune response, evidenced by the synthesis of specific antibodies, when administered in the
native form by the oral and nasal routes or with two denatured capsid proteins by the subcutaneous route. The use of adjuvants in
the oral and nasal immunizations was not necessary. The 43 and 23 kDa protein fractions were responsible for the immunogenicity
of the virus, evidenced by the synthesis of specific antibodies detected by ELISA test. The cellular proliferation analysis of the
Peyer‘s patches revealed an increase (r=0.88) of leucocytes along 42 days after immunization. The results reinforce the possibility
of the use of CPSMV as a safe vector of antigens for human/animal diseases of low immunogenicity for the production of vaccines.